為什么細(xì)胞培養(yǎng)需要用二氧化碳培養(yǎng)箱?
一般細(xì)胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中重要的pH緩沖系統(tǒng)),所以大多數(shù)培養(yǎng)液用它來(lái)保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時(shí),常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。對(duì)大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。
污染是導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗的一個(gè)主要因素,因而,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們?cè)O(shè)計(jì)了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長(zhǎng)的區(qū)域和表面,并結(jié)合自動(dòng)排除污染裝置來(lái)有效防止污染的產(chǎn)生。
例如,鑒于二氧化碳培養(yǎng)箱在使用過(guò)程中有時(shí)會(huì)伴有霉菌生長(zhǎng),為確保培養(yǎng)箱免受污染且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)了帶有紫外清潔功能的增強(qiáng)型二氧化碳培養(yǎng)箱;*銅外殼HEPA濾器能過(guò)濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過(guò)濾除去99.97的0.3um以上的顆粒(上海潤(rùn)度生物提供的培養(yǎng)箱可過(guò)濾除去99.97的0.2um以上的顆粒),并能有效殺死過(guò)濾時(shí)被擋在濾器內(nèi)的微生物顆粒;此外,自動(dòng)殺菌裝置能使箱內(nèi)溫度達(dá)到90℃或更高溫度從而殺死污染微生物,當(dāng)它與HEPA系統(tǒng)結(jié)合使用就能夠極大的減少污染。這些裝置對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說(shuō)是必不可少,但選擇何種清潔裝置呢?當(dāng)然功能越多越好,但是價(jià)格也會(huì)隨之上升。如果經(jīng)費(fèi)有限,只能選擇一個(gè)價(jià)格較便宜的,這時(shí)就應(yīng)該配合使用一些消毒劑和除菌劑,經(jīng)常進(jìn)行消毒滅菌,也能達(dá)到貴儀器的效果,只是比較麻煩一點(diǎn)而已。
總之,無(wú)論選擇何種裝置,都要時(shí)刻注意保持培養(yǎng)箱的清潔,經(jīng)常清理箱體,這樣才能增加儀器的使用壽命,并使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,保證結(jié)果的可靠性。